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食品微生物快速检测技术研究

作者：杨仁敏日期：2013-12-24 09:32 来源：《才智》

吉林省通榆县疾病预防控制中心吉林通榆 137200

摘要：食品微生物，是与日常食用产品相的微生物简称。包括发酵食品、食品腐败、食物中毒微生物三个种类。研究食品微生物的性状及其与食品相互关系的科学称为食品微生物学。随着科学技术的日新月异，食物微生物的快速检测技术和自动化技术的研究发展较快，一些新技术已广泛应用于现代医学、食品、工农生产和生活中。
关键词：食品微生物检测技术
食品微生物的检测技术很多，比较传统的方法是依靠培养基进行培养、分离及生化鉴定。如今，科学发展突飞猛进，现代微生物检测技术已经能够综合引用微生物学、分子生物学、化学、免疫学生物物理学等试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定和计数，同以往所应用的技术相比，具有方便、快捷、准确、高效的特点。
1. 色谱检测技术
根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。色谱检测技术的工作原理是这样的，将微生物细胞经过水解、甲醇分解、提取以及硅烷化、甲基化等衍生化处理后，让其分离出尽可能多的化学组组成分，然后将这些成分提给供气相色谱仪，由气相色谱仪进行分析。通过分析，在不同微生物色谱图中，通常大多数的峰都是共性的，只有少数的峰具有特征性，可被用来进行微生物鉴定。分析检测各种常见细菌、酵母菌、霉菌等。要在气相色谱仪允许的条件下可以气化而不分解的物质，都可以用气相色谱法测定。对部分热不稳定物质，或难以气化的物质，通过化学衍生化的方法，仍可用气相色谱法分析。应用在卫生检验中用来检测空气、水中污染物如挥发性有机物、多环芳烃；农作物中残留有机氯、有机磷农药等；食品添加剂苯甲酸等；体液和组织等生物材料的分析如氨基酸、脂肪酸、维生素等。在医学检验中用来检测体液和组织等生物材料如脂肪酸、甘油三酯、维生素、糖类等的分析。在药物分析中应用在抗癫痫药、中成药中挥发性成分、生物碱类药品的测定等。
2.ATP 荧光检测法
这种方法是按照萤火虫的发光原理，在荧光素酶的作用下，利用荧光素体系进行快速检测三磷酸腺苷（也被称作ATP）的检测方法。ATP 提供能量，荧光素在荧光素酶的化学催化作用下会被氧化掉，在发生化学反应的过程中能够发出荧光。所以，我们可以通过测所采定的样品中ATP 浓度来推算出活菌数。在一般情况下，细菌的表面都会有一层细胞膜和细胞壁包着，因些说如果样品没有经过处理是不能被测定的。测定时需先将样品与微生物用提取试剂混合，使细胞膜和细胞壁开孔，提取出ATP 提取试剂是以表面活性剂为基质的专用试剂。然后，再与荧光素和荧光素酶生物发光试剂作用，用荧光仪测定与发光试剂反应的生物发光量。光子的数量与ATP 含量成正比。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫生状况。适用于食品饮料生产过程关键控制点监控，医疗系统和卫生监督机构即时采样监测。
3.ELISA 技术
ELISA, 是酶联接免疫吸附技术的英文简称，是酶免疫测定技术中应用最广的技术。这项技术是1971 年瑞典学者和荷兰学者将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测试方法，广泛应用在生物学医学等领域。ELISA 是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用结合起来。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。比较常用的是ELISA 双抗体夹心法及ELISA 间接法。前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。在寄生虫病方面，它用于对疟原虫、阿米巴、利日曼原虫、血吸虫、囊虫、肺吸虫、肝吸虫、血丝虫等血清学诊断，这对人医和兽医都很重要。在病原微生物方面已用于检查链球菌、沙门氏菌、布氏杆菌、结核杆菌、淋球菌等的抗体，还可用于破伤风抗毒素和霍乱弧菌抗毒素的测定。在免疫性疾病方面有试用作自身疫病抗体测定以及对过敏的诊断，例如检测各种过敏原的抗体、DNA 抗体及甲状腺球蛋白抗体，红斑性痕疮抗体等等。在卫生学方面，可用于检测食品中葡萄球菌肠毒素及沙门氏菌毒素等等。
参考文献:
[1] 王晶，王林，黄晓蓉. 食品安全快速检测技术. 化学工业出版社.
[2] 微生物检测技术. 化学工业出版社，第1 版 (2009 年6 月1 日).
作者简介：
杨仁敏，吉林省通榆县人，疾病预防控制工作，卫生检验专业毕业，中级专业技术职务，主要研究血清学、布病、流行性出血热。